La culture de microbes dans le laboratoire

Si vous êtes intéressés à étudier un microbe particulier dans un laboratoire, vous aurez besoin pour créer un environnement qui pourra accueillir ainsi sa croissance. Média culturel contient toutes les choses qui un microbe besoin pour la croissance. Les conditions de culture sont des conditions qui sont dans le microbe de optima de croissance (conditions environnementales externes qui permettent la croissance optimale de l'organisme).

Le milieu de culture utilisé pour un microbe particulier doit contenir toutes les exigences chimiques pour cet organisme, ainsi que avoir le pH et la concentration du soluté droite et être incubés dans les conditions de température et d'oxygène droite. Voici quelques-uns des différents types de milieux de culture:

  • Milieux chimiquement définis sont ceux où la concentration de tous les composants qu'il contient sont connus. Souvent, des milieux chimiquement définis sont utilisés pour étudier des aspects spécifiques de la croissance microbienne et le métabolisme.

  • Milieux complexes sont ceux dans lesquels la concentration des éléments nutritifs est inconnu. Ces médias sont les plus couramment utilisés dans les laboratoires de microbiologie, parce qu'ils travaillent bien à la culture d'une variété de micro-organismes. Milieux complexes contiennent des ingrédients tels que les produits d'origine animale ou végétale, dont les ingrédients chimiques exacts ne sont pas connus. Ils sont souvent utilisés pour cultiver suffisamment de biomasse microbienne à être utilisé pour la recherche.

  • Des milieux de croissance anaérobie contient des agents qui éliminent l'oxygène dissous dans les réduire.

  • Les milieux sélectifs sont utilisés pour isoler des micro-organismes d'intérêt particuliers. L'idée derrière des milieux sélectifs est de décourager ou d'inhiber complètement la croissance de tous, mais le microbe que vous voulez à la culture. Ceci est accompli grâce à l'utilisation d'additifs qui sont nocifs pour toute mais le microbe d'intérêt et des conditions qui favorisent le microbe désiré, qui devient trop grand pour le reste.

  • Milieux d'enrichissement est un type de milieux sélectifs spécifiquement conçu pour encourager la croissance des microbes qui sont soit présent dans un échantillon en très petits nombres ou sont facilement surpassés par les autres microbes présents dans l'échantillon. Si les microbes que vous souhaitez développer métaboliser quelque chose de rare, comme le phénol, il peut être ajouté comme seule source de carbone et ne permettent microbes qui dégradent à grandir.

  • Médias différentiel contient des composés qui changent de couleur en fonction du métabolisme des microbes présents. Un exemple de ceci est la gélose au sang à laquelle les bactéries forment des halos autour des colonies comme ils leurs Lyse (casser), les globules rouges.

De nombreux types de supports existent qui sont à la fois sélectif et différentiel de manière à identifier et développer des microbes particuliers rapidement.

Chacun de ces types de supports peuvent être utilisés sous forme liquide ou sous forme solide. Pour faire la version solide de chaque milieu, gélose (une substance extrait d'algues) est ajouté au milieu, puis il est chauffé (généralement pendant la stérilisation). On verse le mélange dans un récipient. Après refroidissement, l'agar définit le milieu dans une forme semi-solide sur laquelle peuvent se développer des cultures microbiennes.

L'obtention d'une culture pure d'un microorganisme présentant un intérêt est effectuée par inoculation d'une plaque de support solide d'une manière spécifique. Dans la figure, les lignes noires indiquent ce que vous auriez fait dessiner sur une plaque de gélose à l'aide d'un bâton ou une boucle comme un “ dessin outil ” après avoir touché à certaines bactéries.


La partie inférieure de la figure montre où les bactéries se développeraient (les cercles) suit le long des lignes que vous “ a attiré ”. Étant donné que les microbes sont réparties sur la plaque de la façon représentée, elles sont diluées de telle sorte que des colonies uniques peuvent être isolés. Colonies qui ressemblent probablement du même organisme.

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Pour microbes qui nécessitent anoxique (exempt d'oxygène) conditions, il ya quelques façons d'exclure l'oxygène des conditions de croissance. Le premier concerne un récipient scellé contenant une combinaison chimique qui produit de l'hydrogène (H2) Et de dioxyde de carbone (CO2). L'hydrogène se combine avec l'oxygène (O2) En présence du catalyseur pour former de l'eau.

L'autre méthode est d'une grande chambre qui est purgée avec un gaz inerte, habituellement de l'azote gazeux (N2), Qui remplace l'air régulière.

Certains microbes - à savoir, ceux qui vivent dans les animaux - ne peut croître que des niveaux élevés de CO2. La gamme de CO2 nécessaire est généralement comprise entre 3 et 5 pour cent et peut être atteint en allumant une bougie dans un bocal fermé ou en utilisant des chambres de croissance plus modernes spécialement conçu pour réguler la quantité de CO2.

Le niveau d'un micro-organisme de la biosécurité est le niveau de précaution nécessaire lorsque l'on travaille avec elle et est basé sur sa capacité connue pour causer la maladie humaine. Les niveaux de biosécurité commencent à 1 (la plus sûre) et aller à 4 (zone chaude) et ont été décidées pour tous les microbes sur lequel la recherche est effectuée.

Pour travailler avec un pathogène de niveau 3, les chambres et les équipements de confinement spéciales sont nécessaires que tout garder sous pression négative et de filtrer tout air sortant d'entre eux. Niveau 4 pathogènes exigent les mêmes précautions, en plus du personnel doivent porter des vêtements de protection qui ont leur propre alimentation en air.


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